Desarrollo de una plataforma de PCR en tiempo real basada en la amplificación del gen LIPL32 para la detección de especies patógenas de leptospira en muestras de sangre y orina [recurso electrónico] / Erika Selena Hernández Robles ; director, Francisco Javier Monge Navarro.
Tipo de material:
Archivo de ordenadorDetalles de publicación: Mexicali, Baja California, 2015Descripción: 1 recurso en línea, 62 p. : il. colTema(s): Leptospirosis en animales -- Tesis y disertaciones académicasClasificación LoC:SF809.L4 | H47 2015Recursos en línea: Tesis digital 
Nota de disertación: Tesis (Maestría) --Universidad Autónoma de Baja California. Resumen: La leptospirosis es la infección producida por especies patógenas de espiroquetas del género Leptospira y es considerada como la enfermedad zoonótica bacteriana más frecuente en todo el mundo. Los animales funcionan como reservorios de leptospiras excretándolas a través de la orina y contaminando fuentes de aprovisionamiento de agua y alimentos, que al entrar en contacto con un huésped susceptible humano o animal, perpetúan el ciclo de la enfermedad. La mayoría de los casos de leptospirosis son diagnosticados mediante pruebas serológicas, sin embargo; los anticuerpos se detectan en la sangre después una semana después del inicio de los síntomas postergando el inicio de los tratamientos. Recientemente, las técnicas que utilizan el RT-PCR se han convertido en la herramienta molecular más utilizada para la detección y diagnóstico de leptospiras debido a su alta sensibilidad y especificidad a partir de una gran variedad de muestras biológicas. De ellas, las que utilizan el gen LipL32 que codifica para una proteína inmunoreactiva dominante que se expresa exclusivamente en las cepas patógenas de Leptospira, se ha convertido en un excelente objetivo para la amplificación por RT-PCR de leptospiras patógenas en distintos tipos de muestras biológicas, permitiendo una discriminación entre las serovariedades saprófitas y el establecimiento de un diagnóstico más rápido y eficiente. En el presente trabajo, se desarrolló e instrumentó un sistema RT-PCR que amplifica un fragmento de ADN del gen LipL32 a partir de muestras de sangre completa y orina. Para la instrumentación de la plataforma RT-PCR para Leptospira, se probaron 79 muestras de ADN extraídas de muestras de sangre de las cuales 60 (75.95%) resultaron positivas, asimismo; se probaron 60 muestras de orina de las cuales 8 (13.33%) resultaron positivas, resultando en una plataforma de diagnóstico molecular altamente sensible y específica para la detección de leptospiras patógenas a partir de muestras de sangre y orina. La plataforma RT-PCR para Leptospira desarrollada en este trabajo, puede convertirse en una herramienta valiosa para el diagnóstico rápido y certero en casos individuales, en situaciones de brotes epidémicos de esta enfermedad, así como para establecer un diagnóstico diferencial con brotes de enfermedades febriles indiferenciadas. Asimismo, se recomienda la validación de la plataforma RT-PCR para Leptospira con muestras de pacientes que cuenten con historial clínico a fin de establecer los parámetros y condiciones más apropiados de su uso en el diagnóstico de esta enfermedad.
| Tipo de ítem | Biblioteca actual | Colección | Signatura | Copia número | Estado | Fecha de vencimiento | Código de barras |
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| Tesis | Instituto de Investigaciones en Ciencias Veterinarias | Área de Préstamo | SF809 .L4 H47 2015 (Browse shelf(Abre debajo)) | 1 | Disponible | VET007917 |
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Maestría en Ciencias Veterinarias.
Tesis (Maestría) --Universidad Autónoma de Baja California.
Incluye referencias bibliográficas.
La leptospirosis es la infección producida por especies patógenas de espiroquetas del género Leptospira y es considerada como la enfermedad zoonótica bacteriana más frecuente en todo el mundo. Los animales funcionan como reservorios de leptospiras excretándolas a través de la orina y contaminando fuentes de aprovisionamiento de agua y alimentos, que al entrar en contacto con un huésped susceptible humano o animal, perpetúan el ciclo de la enfermedad. La mayoría de los casos de leptospirosis son diagnosticados mediante pruebas serológicas, sin embargo; los anticuerpos se detectan en la sangre después una semana después del inicio de los síntomas postergando el inicio de los tratamientos. Recientemente, las técnicas que utilizan el RT-PCR se han convertido en la herramienta molecular más utilizada para la detección y diagnóstico de leptospiras debido a su alta sensibilidad y especificidad a partir de una gran variedad de muestras biológicas. De ellas, las que utilizan el gen LipL32 que codifica para una proteína inmunoreactiva dominante que se expresa exclusivamente en las cepas patógenas de Leptospira, se ha convertido en un excelente objetivo para la amplificación por RT-PCR de leptospiras patógenas en distintos tipos de muestras biológicas, permitiendo una discriminación entre las serovariedades saprófitas y el establecimiento de un diagnóstico más rápido y eficiente. En el presente trabajo, se desarrolló e instrumentó un sistema RT-PCR que amplifica un fragmento de ADN del gen LipL32 a partir de muestras de sangre completa y orina. Para la instrumentación de la plataforma RT-PCR para Leptospira, se probaron 79 muestras de ADN extraídas de muestras de sangre de las cuales 60 (75.95%) resultaron positivas, asimismo; se probaron 60 muestras de orina de las cuales 8 (13.33%) resultaron positivas, resultando en una plataforma de diagnóstico molecular altamente sensible y específica para la detección de leptospiras patógenas a partir de muestras de sangre y orina. La plataforma RT-PCR para Leptospira desarrollada en este trabajo, puede convertirse en una herramienta valiosa para el diagnóstico rápido y certero en casos individuales, en situaciones de brotes epidémicos de esta enfermedad, así como para establecer un diagnóstico diferencial con brotes de enfermedades febriles indiferenciadas. Asimismo, se recomienda la validación de la plataforma RT-PCR para Leptospira con muestras de pacientes que cuenten con historial clínico a fin de establecer los parámetros y condiciones más apropiados de su uso en el diagnóstico de esta enfermedad.
