Desarrollo y aplicación de un sistema elisa basado en el uso de proteína LIPL32 recombinante para la detección de anticuerpos contra leptospiras patógenas en perros callejeros de Mexicali, Baja California, México [recurso electrónico] / Vilma Edith Ortiz Camacho ; director, Francisco Javier Monge Navarro

Maestría en Ciencias Veterinarias.

Tesis (Maestría) - Universidad Autónoma de Baja California, Instituto de Investigaciones en Ciencias Veterinarias, Mexicali, 2021

Incluye referencias bibliográficas.

La leptospirosis es una enfermedad infecciosa, zoonótica, ampliamente
subestimada que se distribuye por todo el mundo, con más de un millón de casos
de enfermedad confirmados y 65,000 muertes cada año. Distintas especies
animales funcionan como reservorios de Leptospira, excretándolas por la orina
que, al entrar en contacto con un huésped susceptible, mantienen el ciclo
biológico de la enfermedad en el ecosistema. La utilización de plataformas ELISA
para el diagnóstico serológico de leptospirosis ha sido ampliamente
documentada a partir de la utilización de distintas preparaciones de antígenos
crudos, purificados y más recientemente, proteínas recombinantes altamente
purificadas, lo cual ha permitido el desarrollo de pruebas serológicas con niveles
de sensibilidad y especificidad superiores a 90%. En este trabajo, se presenta el
desarrollo y aplicación de una plataforma ELISA indirecta, basada en la
utilización de la proteína LipL32 recombinante como herramienta de escrutinio
serológico para la detección de anticuerpos contra Leptospira spp. en muestras
de plasma provenientes de perros callejeros del municipio de Mexicali, BC. Para
tal efecto, se probaron 331 muestras de plasma provenientes de perros callejeros
capturados por el CMCA de Mexicali durante los años 2015 (n=110), 2018
(n=88), 2019 (n=52) y 2020 (n=81). Los resultados de las pruebas ELISA-LipL32
con muestras de campo indican que los controles positivos desarrollaron una
D.O. promedio de 0.892 (D.E. 0.0694) y los controles negativos un D.O. promedio
de 0.074 (D.E. 0.0116) para una razón P/N de 11.51. Los resultados de D.O.

vi

fueron organizados de menor a mayor por cuartiles, donde el Q1 acumuló 13

muestras, el Q2 164, el Q3 115 y el Q4 39 especímenes probados. Para el ELISA-
LipL32 se tomó como valor de corte para muestras positivas una D.O. ≥0.821,

que corresponde al promedio de la D.O. de las 331 muestras analizadas para
una seroprevalencia de 46.52% en el período 2015 a 2020. Las muestras con
D.O ≥ 0.821 en el año 2015 sumaron 51/110 para una seroprevalencia de
46.36%, para 2018 sumaron 51/88 y seroprevalencia de 57.95%, para 2019
sumaron 15/52 y seroprevalencia de 28.85% y para 2020 sumaron 37/81 y
seroprevalencia de 45.68%. Los resultados sugieren una amplia distribución de
leptospirosis en la población de perros callejeros de Mexicali durante los años
2015 a 2020, lo cual representa un problema de salud pública tanto para la
población de perros y otras especies animales como para los humanos por el
riesgo zoonótico de esta enfermedad y hacen evidente la urgente necesidad de
establecer estrategias de intervención para abordar el problema de la
leptospirosis en el municipio. Se considera necesario realizar la validación
analítica de la plataforma ELISA-LipL32 para establecer los parámetros de
sensibilidad y especificidad de la prueba bajo diferentes escenarios
epidemiológicos ocasionados por Leptospira.